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抗人球蛋白交叉配血卡标准操作程序
来源:大發官方生物    发布时间:2009年11月21日

一、准备工作

    (一)微柱凝胶试剂卡的准备:观察外观,如有干胶、杂质、气泡不可使用,之后将卡放置室温(1825℃)平衡,再用专用离心机离心5分钟。

    (二)检测标本的准备:

     1.红细胞悬液的制备:将受血者与献血者的红细胞和血浆分离,各取其压积红细胞10ul,分别加入含1.01.2毫升红细胞稀释液的两个试管中,外观应为均匀淡红色,无絮状物和血块。

     2.血清标本的制备:采集被检对象静脉血,放入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中,10分钟后离心,取上清

二、操作步骤

      1.将准备好的抗人球蛋白交叉配血卡做好标记。

      2.将献血者红细胞悬液1滴(或50μl)与受血者血清1滴(或50μl)先后加入主侧管中。

      3.将受血者红细胞悬液1滴(或50μl)与献血者血清1滴(或50μl)先后加入次侧管中。

      4.加样后的试剂卡,置37℃孵育器中孵育15分钟。

      5.使用专用离心机离心5分钟(900rpm2分钟,1500 rpm3分钟),取出肉眼观察结果。

三、结果判定

     1.阴性结果:红细胞完全沉降于凝胶管底部,表明受血者与献血者血型相合。

     2.阳性结果:红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中,表明受血者与献血者血型不相合。

四、注意事项

  1.应用直接抗人球蛋白微柱凝胶免疫试验检测病人红细胞时,一定要用适量EDTA的试管采血液标本,该标

     本不能放入4℃-10℃冰箱保存,以避免红细胞病人体外致敏所致假阳性反应。

  2.红细胞标本一定不能被细菌污染,否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。如不

     得不用过夜血或陈旧血,则必须首先用该标本做阴性对照试验,以确定该标本是否可以做本实验。

  3.血清标本:血清标本必须充分去纤维蛋白,否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出,阻碍阴性红细胞沉

     淀,呈假阳性反应。

  4.如在微柱凝胶管中出现溶血现象,强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应,也不排除其他原因所致溶血,

     故对此标本一定认真分析,并向上级主管技术人员报告并讨论其原因。

  5.每日试验前,先取出微柱凝胶卡放置至室温。

  6.试剂卡应放在18-25℃储存,如若长期放在4℃冰箱,建议每1-2个月取出,用专用离心机离心一次,以防

     止干胶或产生气泡。

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